青鹏软膏的作用与功效(靑鹏软膏)

中国临床药理学与治疗学中国药理学会主办CN341206/ISSN10092501Email:Oct;15(10)10928收稿20101018硕士在读,研究方向:免疫药理与肿瘤药理学。Tel:Email:博士,硕士生导师,主要研究方向:免疫药理与肿瘤药理学。Tel:比较研究奇正青鹏软膏与辣椒碱软膏的抗炎镇痛作用及机制北京大学医学部基础医学院,北京100191;山东中医药大学,济南250355,山东摘要目的:探讨奇正青鹏软膏(简称青鹏软膏)和辣椒碱软膏在治疗关节炎疼痛作用及机制上存在的相似性及差异性。方法:分别用两种药物预处理大鼠,观察两药作用下福尔马林致痛模型大鼠的疼痛行为反应、局部组织病理变化、足底炎性痛局部组织物质(SP)的表达、血清一氧化氮的水平以及血浆内啡肽(EP)的水平。结果:与模型组比较,青鹏软膏及辣椒碱各剂量组均能明显改善局部组织病理状况,并显著降低大鼠SP阳性细胞积分光度值(软膏两剂量组和辣椒碱大剂量组均抑制福尔马林II相疼痛、降低血清NO水平(并提高血浆EP的水平(鹏软膏没有局部刺激作用,其作用具有剂量依赖并且对福尔马林相疼痛有抑制作用。

结论:青鹏软膏与辣椒碱的镇痛作用机制有很大的相似但青鹏软膏的作用可能更加广泛和可控。关键词青鹏软膏;辣椒碱;关节炎;福尔马林疼痛中图分类号:R965.10092501(2010)10110006奇正青鹏软膏为传统藏药,药效学及临床实验结果证明其对类风湿性关节炎、风湿性关节炎、骨关节炎等骨关节疼痛症效果明确。其机制可能为降低关节炎症介质前列腺素E2(PGE2)及影响IL1、TNF等细胞因子的促炎效。辣椒碱具有抗炎、镇痛作用并用于风湿性关节炎的止痛,其主要是通过影响物质的合成、储存与释放。两药在临床上均用于关节炎疼痛的治疗。大鼠福尔马林致痛模型能模拟临床慢性炎性疼痛,是机体对福尔马林引起组织损伤所产生的缓慢而持续性的伤害性刺激做出的相应反应,目前国内外已公认的、较短期机械或热刺激更为可靠的动物疼痛模型,已普遍应用于疼痛机制研究及镇痛药物评价过观察青鹏软膏和辣椒碱软膏对疼痛模型的抑制作用,检测血清EP)水平,以比较两种药物作用及可能机制的相似性和差异性,从而为临床合理用药提供实验支持。动物选择健康雄性Wistar大鼠48重180~200清洁级,购自北京大学医学部实验动物科学部,合格证号:SCXK(药品和试剂奇正青鹏软膏,由西藏奇正藏药股份有限公司提供(批号:20080905)椒碱软膏,长春普华制药股份有限公司产品(080125)。

抗凝剂EDTA2Na、抑肽酶)购自北京普尔伟业生物科技有限公司。福尔马林,京化学试剂公司产品。NO试剂盒,南京建成生物工程研究所产品。兔源P物质一抗试剂盒,国MILLIPORE公司产品,LV1458672。二步法兔/鼠通用型二抗免疫组化检测试剂盒,基因科技(上海)有限公司产品,生产批号:2401774A。分组及给药将大鼠随机分为正常对照组、模型对照组、青鹏软膏kg剂量组、青鹏软kg剂量组、辣椒碱软膏1kg剂量组和辣椒碱软膏2kg剂量组,组。青鹏软膏和辣椒碱软膏预先局部给药,共给药10大剂量组为每日2kg;小剂量组为每日体重,计每日采用大鼠右后足掌皮下注射福尔马林5%溶液大鼠痛行为反应测定大鼠右后足跖部皮下注射福尔马林后立即置于观察笼中观察。以计数器和秒表分别记录大鼠自发性回缩或振摇注射足次数及舔咬注射足时间(共观察45min之后是15~45min)45min的累计舔足时间和舔咬右后足掌的次数,以测定行为痛反应。血清NO水平测定取大鼠血清,按试剂盒说明书进行测定。血浆EP水平测定血浆准备:取静脉mL,注入含7.5%EDTA2Na30min离心10min,分离血浆。放置-20。测定前使样本置于室温或冷水复融,再次4min离心min,取上清测定。

测定方法按照北京普尔伟业生物科技有限公司提供的放射免疫测定法测定血浆EP含量。HE染色观察组织学改变取出各组大鼠足底病灶皮肤组织,加入固定液中固定48再移入含20%蔗糖的磷酸缓冲液中,过夜。待次日标本沉底后,AO恒冷箱冰冻切片机作冠状切片,20m。用贴片法进行常规HE染色,随机选取切片20用目镜网格计数法测量足底病灶皮肤组织切片炎性细胞数量。大鼠足局部组织SP表达的检测采用免疫组织化学二步法检测组织中SP表达。取大鼠后足底爪皮,4%多聚甲醛溶液固定24脱水,石蜡包埋、切片,使用过氧化物酶封闭,冲洗,经抗原修复后滴加一抗室温孵育30min,冲洗,冲洗,显色后蒸馏水冲洗。苏木精复染,各级酒精脱水,二甲苯透明,明胶封片。免疫组化图像分析:每组随机选取切片4每张切片随机选取个视野,使用德国Leica公司Q550CW图像分析系统(北京大学医学部实验中心图像室提供)采用Qwin软件仪进行图像分析,测量选取区域的光密度值(OD)和染色面积及总面积。统计学处理各组数据以均数标准差(表示,组间比较采用方差分析。所有数据输入SPSS10.05表示差异有统计学意义。青鹏软膏、辣椒碱软膏对福尔马林所致炎性疼痛模型大鼠痛行为反应的影响与模型组比两种剂量的青鹏软膏对福尔马林相疼痛的抑制作用有统计学差异(辣椒碱亦有相似的抑制趋势,但无统计学差异(个给药组对福尔马林相疼痛抑制作用均有统计学差异(kg作用更青鹏软膏、辣椒碱软膏对福尔马林所致炎性疼痛模型大鼠血清NO水平的影响模型组与空白组比较,血清NO水平明显升高,反映疼痛作用下大鼠血清NO分泌水平有升高趋势。

与模型组比较,两种剂量的青鹏软膏及2kg的辣椒碱对血清kg的作用更强(青鹏软膏、辣椒碱软膏对福尔马林所致炎性疼痛模型大鼠血浆EP水平的影响两种剂量的青鹏软膏对血浆EP的水平有一定的促进作kg作用更强,与模型相比差异具有统计学意义(kg辣椒碱对血浆EP水平未表现出明显的影响,kg辣椒碱对血浆EP的分泌有明显促进作用(01)。结果见图3。中国临床药理学与治疗学2010Oct;15(10)01;与模型组比较青鹏软膏、辣椒碱软膏对福尔马林所致炎性疼痛模型大鼠血清NO水平的影响(01;与模型组比较青鹏软膏、辣椒碱软膏对福尔马林所致炎性疼痛模型大鼠足局部组织学改变的影响经HE染色显示,青鹏软膏kg组大鼠其足底表皮水肿不明显,个别有灶性表皮水肿,主要局限于附属汗腺)周围或呈灶状;真皮及皮下浅层组织有散在炎性细胞浸润,但较模型组比较炎性细胞浸润程度减少。青鹏软膏 kg组大鼠足底表皮 及真皮层几乎无水肿。辣椒碱 kg组大鼠足 底表皮几乎无水肿, 真皮层个别有灶性水肿, 真皮 及皮下浅层组织有散在炎性细胞浸润, 但较模型 组比较炎性细胞浸润程度减少。辣椒碱 kg组大鼠真皮水肿比小剂量组轻, 但表皮层反而有 轻度水肿。

结果见图4。目镜网格计数结果见图 青鹏软膏与辣椒碱两软膏均可减轻福尔马林所致真皮层的细胞水肿, 但辣椒碱大剂量对皮肤表 皮细胞水肿无明显影响, 反映该药的局部刺激作 用的存在。 青鹏软膏、辣椒碱软膏对福尔马林所致炎性疼痛模型大鼠血浆EP 水平的影响( 01;与模型组比较 HE染色, 青鹏软膏1g/kg 青鹏软膏2g/kg 辣椒碱1g/kg 辣椒碱2g/kg ClinPharmacol Ther 2010 Oct; 15( 10) 青鹏软膏、辣椒碱软膏对福尔马林所致炎性疼痛模型大鼠足局部组织学改变的影响( 01;与模型组比较 青鹏软膏、辣椒碱软膏对福尔马林所致炎性疼痛模型大鼠足底炎性痛病灶组织 SP 阳性成分 反应性的影响 从免疫组织化学染色结果可见, 青鹏软膏及辣椒碱各剂量组大鼠SP 阳性细胞积 分光度值显著低于模型组( 与正常对照组比较无统计学差异( 青鹏软膏和辣椒碱软膏对福尔马林所致炎性疼痛模型大鼠足底炎性痛病灶组织SP 阳性成分反应性的影响( 01;与模型组比较 青鹏软膏、辣椒碱软膏对福尔马林所致炎性疼痛模型大鼠足底炎性痛病灶组织SP 阳性成分反应性的影响( 免疫组化染色,